VB100 流式質譜-宸安生物范雨慶.pdf

《VB100 流式質譜-宸安生物范雨慶.pdf》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《VB100 流式質譜-宸安生物范雨慶.pdf（29頁珍藏版）》請在三個皮匠報告上搜索。

1、宸安生物 范雨慶流式質譜多指標檢測助力臨床精準醫療PART1:流式質譜技術簡述宸安生物是國內第一家成功研制高性能單細胞質譜平臺的公司從設備、試劑、到數據、軟件的端到端原創技術分辨率6001200可調分辨率7001400可調靈敏度48*105cps(1ppb Tb159)靈敏度510*105cps(1ppb Tb159)儀器體積大型、落地儀器體積小型、桌面化樣本可編碼數量135+進樣系統自動進樣及清洗模塊，兼備混勻制冷控溫功能，兼容多種樣本載具Starion星瀚Lunarion宵暉TM流式質譜VS傳統流式平臺迭代指標傳統流式光譜流式質譜流式代表廠商抗體標簽熒光基團熒光基團金屬元素細胞分型精細度大

2、幅提升，金屬標簽選擇更多通道數量2064135常規檢測通道數量8色8-24色8-50色配色方案難難簡單臨床使用更加便捷，無需考慮熒光標簽的串色及補償熒光補償需要不需要不需要試劑成本成本中等成本高成本低標簽成本非常低，不需用稀有熒光素數據分析難難簡單樣本制備和數據分析自動化，無需復雜預處理自動化難以自動化難以自動化自動化檢測速度免疫監控慢快快節省時間及人力，Barcode試劑可以實現多樣本同時檢測檢測速度血液疾病慢快更快可拓展性無無可拓展革命性的標簽體系，實現蛋白質以及核酸胞內胞外檢測渠道下沉基層醫療：單激光小流式三甲醫院：8色以上流式僅限于三甲醫院易拓展有利于進入基層醫療市場，使用簡單、自動化

3、流式質譜正式邁入臨床診斷流式質譜編碼試劑已取得30項相關試劑/抗體產品注冊證，覆蓋臨床常見的流式抗體，可精準、穩定開展免疫細胞亞群分群等項目已有標記抗體目錄300余種，可滿足大部分主流檢測需求，取證工作陸續開展中利用barcoding編碼，可實現多樣本同時上樣、同時分析一次上機可以得到20個樣本數據，單樣本平均成本降低50%，大大節約檢測成本與時間流式質譜抗體300+試劑體系，已完成30項試劑的注冊申報宸安生物試劑體系流式質譜抗體，強大且穩定性能穩定！液體混合抗體再不同溫度放置50天后PBMC染色結果-204RT37凍干微芯CD8CD4檢測項目指標臨床診斷結果%Starion星瀚檢測結果%淋巴

4、細胞亞群CD3+T 細胞占淋巴細胞63.2462.44CD3+CD4+T細胞占淋巴細胞30.6631.14CD3+CD8+T細胞占淋巴細胞25.7225.16CD3-CD16+CD56+NK細胞占淋巴細胞23.6224.68CD3-CD19+B細胞占淋巴細胞11.111.24PART2:免疫概述及流式質譜技術多指標檢測的臨床應用臨床流式應用場景及市場容量飛速發展流式細胞技術平臺細胞分析淋巴細胞亞群檢測白血病免疫分型微小殘留病檢測PNH檢測血小板功能檢測可溶性蛋白分析高通量細胞因子檢測趨化因子檢測根據Markets&Markets的統計，2021年流式細胞儀全球市場達43億美元，預計2026年達

5、到63億美元，復合增長率為8.1%。目前國內流式細胞儀市場約為12億美元，復合增長率可達30%，可以看出國產流式細胞儀還有很大的增量空間。鏈接：https:/ eater”存在于血液和組織中巡邏、吞噬、消化、降解細菌，發生活化，將抗原呈遞給其他細胞巨噬細胞的非免疫功能看家（“housekeeping”）：清除死細胞（如衰老的紅細胞）、清除細胞碎片、不會伴隨活化粒細胞肥大細胞單核/巨噬固有免疫非常重要的抗原遞呈細胞，也可以從單核細胞分化而來pDC、cDC能將病原體、宿主突變細胞、過敏原等大分子，處理成適應性免疫（B、T細胞）可識別和讀取的片段（抗原）單純抗原不能活化T細胞，需與DC表面合適的MH

6、C分子共同遞呈，因此MHC起著檢查點的作用，幫助免疫細胞區分自我和外來的細胞既有固有免疫，又有適應性免疫功能胞內含特殊顆粒，顆粒內的蛋白誘導靶細胞穿孔和發生凋亡識別和殺滅病毒感染細胞或腫瘤細胞非常重要在小鼠模型中發現，NK細胞也能像適應性免疫細胞，保留記憶功能，從而在同種病原體二次感染時快速反應樹突狀細胞自然殺傷細胞NK適應性免疫B細胞B細胞兩大功能：遞呈抗原給T細胞；產生抗體中和病原體抗原結合并包裹病原體表面，發揮三重作用：中和、調理、補體激活中和抗體結合病原體調理結合了抗體的病原體，呼喚免疫細胞（如中性粒細胞、巨噬細胞）去吞噬和消化補體激活直接破壞、裂解細菌IgM通常對補體活化很重要IgD

7、活化嗜堿粒細胞IgG在中和、調理、補體活化過程很重要IgA在胃腸道黏膜的中和作用是必須的IgE在寄生蟲和過敏反應中，活化肥大細胞B細胞抗體種類數不勝數，但主要五大類：IgM、IgD、IgG、IgA、IgE適應性免疫T細胞T細胞家族龐大：CD8+T細胞、CD4+T細胞、DPT、T、NKT作用：殺傷被感染的細胞，活化和募集其他免疫細胞CD8+T又稱細胞毒T細胞，含特殊細胞毒顆粒，識別和殺傷病毒感染細胞和腫瘤細胞，受免疫系統嚴格調控CD4+T最常見分類：TH1、TH2、TH17、TregTH1針對胞內病原體（尤其是細菌），產生和分泌因子活化其他免疫細胞（如吞噬細菌的巨噬細胞），細胞免疫為主TH2針對

8、胞外病原體（如寄生蟲），活化B細胞、粒細胞、肥大細胞，體液免疫為主TH17在控制胃腸道免疫平衡上特別重要，過度活化易導致自身免疫病Treg監視和控制其他T細胞活性，防止免疫異?；罨?，維持耐受性免疫T細胞臨床免疫細胞檢測方案的演變歷程T亞群檢測CD3/CD4/CD8/CD45淋巴細胞亞群檢測CD3/CD4/CD8/CD19/CD16/CD56/CD45T細胞活化功能檢測T亞群+CD27+HLA-DRT細胞耗竭功能檢測T亞群+PD-1+CTLA4淋巴細胞精細免疫分型淋巴細胞亞群檢測+CD28+HLA-DR可以滿足臨床需求嗎？NO！1.固有免疫系統檢測的缺失；2.淋巴細胞細分亞群檢測的缺失；3.固有

9、免疫和適應性免疫關系的缺失。PanelPanel設計設計No.TargetLabelFunction1CD127139LaTreg2CD4141PrT3CD194/CCR4142NdTh subsets 4CD196/CCR6143NdTh subsets 5CD15144NdNeutrophils6IgD145NdMemory/Nave B7CD27146NdMemory/Nave T、B8CD45RO147SmMemory/Nave T9CD57148NdT Exhaustion10CD28149SmT Activation11HLA-DR151EuDC12CD8a152SmT13CD45

10、RA153EuMemory/Nave T14CD123/IL-3R154SmDC、Granulocyte15PD1155GdNo.TargetLabelFunction16CD183/CXCR3156GdTh subsets17CD11c158GdDC、Monocyte18CD16159TbNK19CD19160GdB20CD24161DyTransitional B21CD185/CXCR5162DyB、TFH22CD25/IL-2RA163DyTreg23CD14164DyMonocyte24TCRgd165HoT25CD56166ErNK、NKT26CCR7167ErMemory/Nav

11、e T27CD38170ErPlasmablast28CD45171YbLeukocyte29CD66b174YbGranulocyte30CD3175LuT研究目的：研究目的：現有基于熒光流式細胞術免疫細胞分析方案僅用于TBNK的骨架標志物的分析，難于覆蓋免疫細胞各個精細亞群，分析的廣度和精度均不足?；诹魇劫|譜平臺的創新試劑，提供了無需補償的30指標分析方案。僅需1管，即可覆蓋免疫細胞各個精細亞群，實現真正的免疫細胞全景分析。免疫細胞全景分析方案（免疫細胞全景分析方案（3030指標）指標）免疫細胞全景分析方案（30指標）數據展示樣本X X圈門方案細胞亞群占比（%）細胞數All pre-pr

12、ocessing100.00%200257Time,Event_Length subsetpre-processing99.30%198865Width,Residual subsetpre-processing92.90%184828Center,Residual subsetpre-processing100.00%184817Offset,Residual subsetpre-processing100.00%184781DNA Ir191，Ir193Single cell99.80%184458Cells/CD3-CD19-/CD56+NK+36.30%13123Cells/CD3-C

13、D19-/CD56-CD14-CD16-CD123+HLA-DR-Basophils41.70%1155Cells/CD3-CD19-/CD56-CD14-CD16-CD11c+HLA-DR-cDC25.80%716Cells/CD3-CD19-/CD56-CD14-CD16-CD123+HLA-DR+pDC13.20%366Cells/CD3-CD19-/CD56-CD14hiCD16-cMo84.50%16898Cells/CD3-CD19-/CD56-CD14+CD16+iMo2.46%492Cells/CD3-CD19-/CD56-CD14-CD16-ncMo10.30%2062Cel

14、ls/CD45+CD66b-CD14-LYM82.50%87177Cells/LYM/CD3-CD19+B 12.00%10495Cells/LYM/B/CD27+Memory B34.00%3570Cells/LYM/B/CD27-IgD+Naive B64.10%6726Cells/LYM/B/CD24-CD38hiplasma2.61%274Cells/LYM/CD3-CD19-CD3-CD19-20.90%18220Cells/LYM/CD3-CD19-/CD56+NK72.70%13239Cells/LYM/CD3+T 66.40%57903Cells/LYM/T/CD4+CD4+T

15、42.60%24658Cells/LYM/T/CD4+T/CD38+HLA-DR+activated CD4+T0.98%242Cells/LYM/T/CD4+T/CD196-CD196-CD4+T58.40%14396Cells/LYM/T/CD4+T/CD196-CD194-CD183+TH113.40%1931Cells/LYM/T/CD4+T/CD196-CD194+CD183-TH210.80%1556Cells/LYM/T/CD4+T/CD196+CD196+CD4+T40.50%9983Cells/LYM/T/CD4+T/CD196+CD194+CD183-TH1731.80%3

16、174Cells/LYM/T/CD4+T/CD45RA-CD45RA-CD4+T61.20%15093Cells/LYM/T/CD4+T/CD45RA+CD45RA+CD4+T32.30%7969Cells/LYM/T/CD4+T/CD57+CD57+CD4+T1.79%442Cells/LYM/T/CD4+T/CD45RA+CD197-Effector CD4+T0.58%142Cells/LYM/T/CD4+T/CD45RA+CD197+Naive CD4+T34.50%8502Cells/LYM/T/CD4+T/CD45RA-CD197+Tcm CD4+T43.90%10826Cells

17、/LYM/T/CD4+T/CD45RA-CD197-Tem CD4+T19.10%4715Cells/LYM/T/CD4+T/CD185+PD-1+TFH1.83%451Cells/LYM/T/CD4+T/CD127lowCD25+Treg9.89%2438Cells/LYM/T/CD4-CD8-CD4-CD8-7.42%4296Cells/LYM/T/CD4-CD8-/CD57+gdTCD57+gdT4.59%197Cells/LYM/T/CD8+TCD8+T48.80%28230Cells/LYM/T/CD8+T/CD38+HLA-DR+activated CD8+T1.19%336Cel

18、ls/LYM/T/CD8+T/CD45RA-CD45RA-CD8+T41.70%11762Cells/LYM/T/CD8+T/CD45RA+CD45RA+CD8+T55.50%15679Cells/LYM/T/CD8+T/CD57+CD8+TCD57+CD8+T30.20%8526Cells/LYM/T/CD8+T/CD45RA+CD197-Effector CD8+T18.40%5181Cells/LYM/T/CD8+T/CD45RA+CD197+Naive CD8+T32.90%9295Cells/LYM/T/CD8+T/CD45RA-CD197+Tcm CD8+T5.53%1561Cel

19、ls/LYM/T/CD8+T/CD45RA-CD197-Tem CD8+T39.70%11200Cells/LYM/T/TCRgd+gdT4.87%2820Cells/LYM/CD3+CD56+NKT3.88%3380Cells/CD66b+Granulocytes40.90%75451Cells/CD66b+CD15-CD16-Eosinophils13.70%10351Cells/CD66b+CD15+CD16+Neutrophils85.70%64667深度檢測47個細胞亞群TBNK精細分群T細胞分化階段B細胞功能分析固有免疫系統免疫細胞（單核、粒、DC）表征亞群數據統計多領域專家共識推

20、薦精細免疫分型檢測多領域專家共識推薦精細免疫分型檢測PART3:病例分享病例患者：男，40歲因【發熱5天，肝功能異常3天】入院，體溫最高39.1度，有皮疹，無腹脹腹痛，無惡心嘔吐，無咳嗽。WBC、CRP均正常，甲型、乙型流感病毒、H7N9篩查陰性，予連花清瘟口服，體溫下降，自服泰諾、美林、散利痛、布洛芬，無明顯好轉，外院查肝功能異常，ALT 667U/L，AST 559U/L，總膽固醇Ch 26.9ummol/L。2日后ALT升至1874U/L，AST升至1114U/L，總膽固醇升至69.3ummol/L。2018年9月3日入院后查甲肝病毒核酸陽性，確認急性甲型肝炎。甲肝病毒胞內的模式識別受體

21、（Pattern RecognitionReceptors，PRRs）成員MDAS 入侵肝細胞。甲肝病毒復制快，病毒復制過程中的多種蛋白質均能有效抑制IFN（干擾素）誘導肝細胞無法高效誘導ISG（IFN-stimulated gene，干擾素刺激基因）表達，無法第一時間啟動免疫反應清除病毒病毒瘋狂復制，脹破肝細胞繼續感染鄰近肝細胞肝功能快速惡化。1.短兵相接，先失一城不過慶幸的是，人體的免疫系統并沒有那么不堪肝細胞受到甲肝病毒蹂躪的時候，想到了pDC（漿樣DC）這個強力援手，于是緊急呼叫pDC增援在pDC里面，type IFN得到高效表達，type IFN進一步激活T細胞并保護T細胞免受NK細

22、胞介導的攻擊，是先天性和適應性免疫系統之間切換的關鍵環節。2.強援來到，扳回一局入院第二日細胞類型比例（%）參考范圍總T細胞55.661.1%77.0%CD4+T23.425.8%41.6%CD8+T15.718.1%29.6%TH112.120.3-53.7TH230.846.1-78.9Treg0.51.2-4.0初始CD4+細胞12.26.1-26.6中央記憶CD4+細胞22.38.6-24.6效應記憶CD4+細胞1.50.1-2.9效應CD4+細胞30.712.0-30.6初始CD8+細胞15.13.6-21.8中央記憶CD8+細胞5.51.1-6.7效應記憶CD8+細胞22.86.3

23、-26.2效應CD8+細胞17.11.5-17.2總B細胞13.39.0%14.1%NK細胞22.58.1%25.6%DC12.20.5%1%時間進入戰斗第三個月，由于初期pDC的信息傳遞，T細胞和B細胞得到了充分的動員，固有免疫順利切換到適應性免疫；切換到適應性免疫后，細胞毒性T細胞可以殺滅一部分甲肝病毒，但由于細胞毒性T細胞、NK細胞在消滅病毒的同時，也造成了肝損傷，所以輔助性T細胞對甲肝的控制更加重要，輔助性T細胞的參與甚至比細胞毒性T細胞更早。3.援軍抵達，敵軍潰退第三月細胞類型比例（%）參考范圍總T細胞80.661.1%77.0%CD4+T40.525.8%41.6%CD8+T25.

24、518.1%29.6%TH128.620.3-53.7TH285.746.1-78.9Treg3.31.2-4.0初始CD4+細胞12.26.1-26.6中央記憶CD4+細胞22.58.6-24.6效應記憶CD4+細胞1.560.1-2.9效應CD4+細胞30.712.0-30.6初始CD8+細胞15.33.6-21.8中央記憶CD8+細胞5.71.1-6.7效應記憶CD8+細胞22.16.3-26.2效應CD8+細胞17.81.5-17.2總B細胞18.19.0%14.1%NK細胞22.28.1%25.6%DC2.60.5%1%55.680.655.680.623.440.515.725.5

25、12.128.613.318.112.22.6細胞類型比例（%）參考范圍總T細胞65.861.1%77.0%CD4+T40.325.8%41.6%CD8+T23.918.1%29.6%TH141.120.3-53.7TH279.946.1-78.9Treg3.21.2-4.0初始CD4+細胞25.46.1-26.6中央記憶CD4+細胞14.78.6-24.6效應記憶CD4+細胞1.80.1-2.9效應CD4+細胞17.812.0-30.6初始CD8+細胞14.63.6-21.8中央記憶CD8+細胞5.51.1-6.7效應記憶CD8+細胞18.96.3-26.2效應CD8+細胞13.41.5-1

26、7.2總B細胞13.19.0%14.1%NK細胞23.78.1%25.6%DC0.70.5%1%第四月HCV病毒RNA轉陰80.665.885.779.92.60.7免疫細胞在體內凋亡機制的誘導下，回歸正常水平，免疫細胞與甲肝病毒長達將近半年的戰斗后，逐漸恢復了和平，免疫系統開始恢復平常安靜的監控狀態。4.凱旋整頓，恢復生產小結流式質譜技術作為新一代單細胞靶向蛋白質組學檢測技術，具有靈敏度好、分辨率高、數據量大等多種優勢，給用戶帶來豐富的蛋白質信息；宸安生物多指標檢測方案可以為臨床帶來更加完整的固有免疫+適應性免疫系統的細胞數量和功能信息，提供個性化診療及精準醫療的強大依據。謹 致 謝 忱合作交流公眾號